维真生物 sgRNA文库

基因敲除是实现功能缺失型筛选的重要手段，已被广泛应用于靶向药物研究、抗性基因筛选、基因功能研究、基因组转录激活研究及蛋白质运输及定位等方向。

目前已经广泛应用的RNAi技术的靶标是mRNA，而CRISPR通过RNA识别DNA序列然后再改变DNA序列，是可以遗传的。由于编码mRNA的DNA序列只占总DNA的极少部分，因此靶向DNA序列的CRISPR的靶标要比RNAi广得多，更有可能筛选出针对某DNA序列的特异CRISPR靶标。

在CRISPR/Cas9系统中，sgRNA 与 Cas9 核酸内切酶的复合物能在目的片段生成DNA双链断裂（double-strand breaks,DSBs），诱发由非同源末端连接（NHEJ）修复机制造成的移码突变。CRISPR/Cas9系统可同时沉默多个基因，并具有十分广泛地应用范围，已报道成功应用于细菌、酵母菌、植物、鱼类和哺乳动物中。目前，更加便捷高效的CRISPR sgRNA 文库已逐渐取代 shRNA 文库。

维真生物的人源基因sgRNA慢病毒文库及小鼠基因sgRNA AAV文库配合维真提供的Cas9稳定表达细胞系，将助您在更短的时间内实现高通量筛选！

一、 维真生物 sgRNA文库相关产品及服务

1. sgRNA质粒/病毒

文库名称	靶向基因名称及数量	SgRNA数量	病毒滴度
人源基因sgRNA 慢病毒质粒文库	人源基因 19114个	76441个
	激酶基因 763个	3052个
人源基因sgRNA 慢病毒包装服务	人源基因 19114个	76441个	1×108TU/mL
	激酶基因 763个	3052个	1×107TU/mL
小鼠基因sgRNA AAV质粒文库	转录因子 1650个	8250个
小鼠基因sgRNA AAV病毒包装服务	转录因子 1650个	8250个	1×1013VG/mL

sgRNA AAV载体图谱

2. Cas9稳转株现货

细胞名称	来源	稳定表达基因
HEK293	人	Cas9
Neuro-2A	小鼠

3. Cas9稳转株构建服务

维真生物可根据您实验所需，针对您实验目的细胞，构建Cas9稳转株。详情可联系销售人员。

二、 维真生物 Cas9的活性检测

Cas9的活性检测，可以通过Cas9质粒转染细胞后观察测序结果中的套峰来实现。

Cas9会在识别位点造成DNA双链断裂，断裂处通过易错修复，易造成随机突变。正因如此，通过识别位点上下游引物进行PCR后，产物实为两类PCR产物的混合物，分别是原本序列的PCR产物和突变序列的PCR产物。通过对PCR产物进行测序，将会出现套峰样结果，表明Cas9为有活性的。如未观察到套峰，表明Cas9没有活性或活性极低。

Cas9活性检测结果（测序出现套峰样结果）

三、sgRNA文库高通量筛选技术及其优势

SgRNA 文库高通量筛选技术，指的是利用sgRNA质粒/病毒文库，感染cas9稳定表达细胞系，进而达到高通量筛选的目的。

SgRNA文库高通量筛选技术

相比传统shRNA文库，sgRNA文库具有无可比拟的优势。不仅在操作上节约时间成本，还具有更广泛的应用范围和更卓越的修饰效果。

SgRNA文库高通量筛选技术的优势