目前已经有很多的实验利用AAV1成功的将目的基因导入活体动物体内进行基因治疗,在形态学和功能学上都有了明显的好转。Vglut3是编码囊泡膜谷氨酸转运体3(VGLUT3)的基因,内耳毛细胞表达VGLUT3,如果缺乏VGLUT3将造成听力丧失。听力丧失是由于内毛细胞释放谷氨酸减少,内毛细胞传入突触的突触传导丧失。利用Vglut3基因敲除小鼠,模拟Vglut3纯合突变模型,利用圆窗膜穿刺鼓阶将AAV1-Vglut3-GFP 导入到P0-P12 小鼠内耳。
在形态学方面,实验结果可见100%在内毛细胞表达。在听功能学方面,导入P0-P12小鼠,7-14天检测,ABR阈值在正常范围内,可以持续至少7周,其中有两只小鼠可以保持1年半。如果在P1-P3导入目的基因可以得到更好的内毛细胞表达,以及更长时间的听力恢复。跨膜类似通道-1(TMC1)突变会造成人类常染色体隐性遗传DFNB7/11和常染色体显性遗传DFNA36。小鼠制成相应模型-Tmc1敲除模型以及Tmc1显性点突变模型,利用圆窗膜穿刺将AAV1-Tmc1-GFP导入到P0-P2小鼠内耳。
在形态学方面,实验结果可见大部分在内毛细胞出现基因表达,在顶回极少外毛细胞出现转染。在听功能学方面,ABR阈值不完全恢复,相对于野生型还是有所升高,DPOAE完全没有恢复。Kcnq1基因表达钾通道亚族蛋白,参与内淋巴液钾离子的分泌,建立内淋巴电位。由于Kcnq1只表达在血管纹中间细胞,所以通过中阶导入将AAV1-Kcnq1-GFP 导入到Kcnq1-/- P0-P2 小鼠体内。在形态学方面,实验结果显示,75±5%表达在底回边缘细胞, 71±8%表达在中回边缘细胞,61±10%表达在顶回边缘细胞。
在听功能学方面,治疗后的听力ABR阈值可达40dB SPL,虽然比野生型ABR阈值30dB SPL还是高,但是已经较之前未治疗时阈值达到90dB SPL有了很大的改善。听力保护作用可以稳定存在18周,然后以1.4dB/w的速度下降,在30w后治疗组总的ABR阈值增加17dB。流行病学研究表明在基因造成的耳聋中都是由于Gjb2单个基因突变造成。
Gjb2编码耳蜗连接蛋白Cx26,在哺乳动物非感觉细胞间起到细胞间耦合作。AAV1-Gjb2-GFP通过中阶注射导入Gjb2敲除老鼠的耳蜗中,在形态学方面观察,基因可以在毛细胞、Hensen’s细胞、Claudius细胞、外沟细胞、锤形细胞以及边缘细胞有效表达。在听功能学方面,ABR测定在4KHz-32KHz范围内,治疗组几乎恢复正常[33]。
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