特殊大小的细胞怎样处理?
有的细胞特别大或特别小,特别是一些原代细胞,还有的细胞成团无法计数。对于这种细胞,从预实验开始就会有不同。预实验时,保持感染时细胞的密度达到 30~40%,即使细胞没有预定的 3~5×104个/孔的数目。正式实验的细胞密度也控制在差不多的值。对于成团的如胰岛细胞,胚胎干细胞等,注意细胞团的数目和大小,以便以后的实验按比例放大。
悬浮细胞如何感染?
一种可以参考的感染方法:首先要保证细胞生长状态良好,最好先进行预感染,感染前按实验设计的组别将细胞按预定的数量和体积接种于在 EP 管中,然后加入病毒感染1h后,再将细胞置于孔板中按预实验中的最佳感染条件继续感染。
安全考虑?
病毒操作必须在生物安全水平2级的实验室内进行,穿戴防护衣,使用一次性塑料移液管。固体废物必须经121℃,60min蒸汽灭菌,液体废物经10%终浓度的漂白剂处理后才能弃置。
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