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腺相关病毒AAV 病毒包装
发布日期:2016-10-11 浏览次数 :

  以 10cm 细胞培养皿为例

  第一天: 聚合度90%以上的 HEK293T 细胞按 1:3 比例传盘(每盘大约 2.5 x 10E6),培 养基 Hyclone 高糖 DMEM 培养基(含 10%FBS)。

  第二天: 转质粒前 1-2h 左右,换成无血清培养基(所有血清型 AAV),用转染试剂将目 的基因质粒和辅助质粒(需用酚氯仿提取的质粒)转入HEK293T 中。

  第三天:质粒转化 24h 后,换新的无血清培养基(所有血清型 AAV)

  第五天:转染 72h 收毒。带着培养基,吹下细胞,离心;然后分别收获培养基上清与细胞沉淀。用 PEG8000 沉淀培养基上清中的病毒,沉淀过夜后收集病毒沉淀。

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