将病毒的混合液用碘克沙醇密度梯度离心进行纯化，然后用超滤管进行浓缩。

　　腺相关病毒病毒滴度检验

　　1)腺性相关病毒处理破除 AAV 病毒外壳，37 ℃ 孵育 30 min，然后加热 95 ℃5 min 使 酶失活，体系如下：

　　组成成分 体积

　　病毒液 5ul

　　蛋白酶 K(5ug/ul) 1ul

　　超纯水 4ul

　　2)离心 12000rpm,2min.取上清。

　　3)标准品的拷贝数，7 个梯度稀释浓度分别：

　　7.2E+8V.G./UL,7.2E+7V.G./UL,7.2E+6V.G./UL,7.2E+5V.G./UL,7.2E+4V.G./UL,7.2E+3V.G./UL,7.2E+2V.G./UL.并将超纯水作为阴性对照。

　　4)配制 PCR 反应体系，每个样品 20 ul 体系，体系如下：

　　组成成分 体积

　　2X SYBRGreen 缓冲液10ul

　　F、R 引物混合物 0.8ul

　　超纯水 7.2ul

　　病毒样品或标准品 2ul

　　5)PCR 反应体系

　　组成成分 体积

　　95℃

　　5min;

　　95℃ 15sec

　　60℃ 15sec

　　72℃ 15sec

　　40 个 cycles

　　6)病毒颗粒数公式：病毒颗粒数(个/ml)= 与标准品相对值 × 1000

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