前文已述,rAAV的产生需要4种成分参与,即载体DNA、AAV的复制和包装蛋白(Rep和Cap)、宿主细胞及辅助病毒。我们提出的这种新型的rAAV生产系统将这4种成分两两合并,形成两个部分:一部分是将辅助病毒与Rep和Cap合并,构建一种能提供AAV复制与包装功能的辅助病毒;
另一部分则是将载体DNA与宿主细胞合并,建立一种rAAV的载体细胞株。当用这种新型辅助病毒感染载体细胞株时,rep和cap基因的拷贝数随着辅助病毒的不断复制而增加,同时表达出大量的Rep和Cap蛋白;而Rep蛋白的表达又可以将整合于载体细胞株的rAAV前病毒基因组拯救并复制,这在很大程度上模拟了野生型AAV在细胞内复制的情况,因此可高效生产rAAV。
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