病毒一般可以收两次,可以在 48 h 和 72 h 各收一次。如果你不想麻烦浓缩病毒的话,也可以不浓缩,直接将收集的病毒上清作为要感染的细胞的培养基,但是可能效果会不太好。并且一般收病毒时,培养基的营养已经损耗了很多,那样直接培养感染细胞会损害细胞,所以建议还是进行浓缩后再感染。
如何提高腺病毒的活性?
提高腺病毒的活性,关键应该是在病毒包装过程和扩增过程。纯化过程只是去掉有缺陷的病毒和细胞碎片等容易引起机体免疫反应的过程,如果扩增的病毒滴度高,那么纯化后就会更高的。
纯化后病毒如何保存?
纯化后的病毒用无血清的 DMEM 保存就可以了,一般放在 -80 度进行长久保存。如果收集的上清不想立即纯化可先放在 -80 度,等下次收集的一起纯化。目的蛋白在包装细胞中或者滴度测定细胞中会表达的,滴度测定就是根据目的蛋白表达情况来进行操作的。
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