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慢病毒包装之收集病毒上清
发布日期:2017-01-04 浏览次数 :

  慢病毒包装之收集病毒上清

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  6-10 h后吸去培养基,加入2.5ml37℃预热的完全培养基,继续将细胞放置温箱孵育,40h左右可以收集含慢病毒的上清进行感染或者分装后置于-80℃储存待用。(1500rpm离心五分钟,一般可收集到2ml 含病毒上清)

  慢病毒包装之病毒感染

  1)将细胞平铺于6孔板或12孔板,最佳密度为30%-70%。

  2)对于六孔板:(12孔板减半)

  Infectmouse cells:800-1600µl virus + 1600-800 µl fresh medium =2.4 ml total

  Infecthuman cells:200-800µl virus + 1200 µl-800 µl fresh medium =2 ml total

  3)加入2-5µg/ml polybrene, 充分摇匀后置于37℃温箱孵育。

  4)12-24h 后换液,长满后传代或者检测表达,做实验。

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