使用病毒介导转基因的优势之一就是可以通过调整病毒滴度来改变转导效率。
把AAV8-YFP和AAV1-YFP稀释至1010VP/μL到108VP/μL,将2μL病毒分别注射至P0小鼠侧脑室。整体上看,可发现大脑中荧光标记的强度随病毒滴度的降低呈现明显减弱,AAV1荧光减弱程度更(Fig 6A)。其中,AAV8滴度的降低并不影响荧光分布的区域,仍旧对整个大脑的神经元进行转导;而AAV1滴度的降低使得病毒对脉络丛呈现极高的亲和性(Fig 6B)。
通过优化病毒滴度,可以构建两种研究模型。一种是通过注射高低度的AAV,构建许多转基因神经元包围个别野生型神经元的模型,进而可以进行病毒转导对细胞外影响的相关研究;另一种是通过注射较低滴度的AAV,构建个别转基因神经元模型,进行病毒转导对细胞内影响的相关研究(Fig 6C)。
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