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慢病毒/腺病毒/腺相关病毒（AAV）包装服务

发布日期：2017-11-21 浏览次数 :

维真生物慢病毒包装服务

1. 腺病毒现货

重组腺病毒是进行体内及体外实验最高效的基因运载工具之一。相对于其它转染方法或者病毒运载系统，重组腺病毒的转染效率更高，基因的表达也更快、更高。
重组腺病毒可以在一个广泛的宿主范围内实现基因的高水平表达，包含哺乳动物的分裂细胞及非分裂细胞

重组腺病毒不整合至宿主细胞基因组，不会使宿主细胞的基因激活或者失活
重组腺病毒基因表达通常少于 24 小时

原代肝细胞的转染比较困难，但是对于腺病毒转染原代肝细胞则比较容易。如上图所示，携带 GFP 标签的腺病毒感染原代肝细胞，GFP 高效表达，MOI 值在 10-100 之间，照片为腺病毒感染细胞 48 小时后拍摄。

病毒如何使用？维真生物拥有世界上最大的人源腺病毒库，近 12000 种腺病毒现货，我们可在 2 周内提供 500ul10E10pfu/ml 腺病毒，您收到腺病毒之后，可以将腺病毒转染目的细胞，根据目的细胞的不同，建议首先摸索最佳 MOI 值

	腺病毒优点 --外源性基因的高效表达 --不整合宿主细胞基因组 --转染动物细胞，无需辅助试剂 --合适的 MOI 值转染效率可达 100％

产品规格发货规格：500ul 10E10pfu/ml 腺病毒，2 周发货运输方式：干冰运输储存 Buffer:PBS

基因不表达怎么办？
维真生物保证预制人源 ORF 腺病毒在 HEK293 细胞中表达，多数的预制腺病毒已经在 HEK293 细胞中通过 WB 验证了蛋白表达，如果客户未检测到正确的蛋白表达，我们将在 HEK293 细胞中复检蛋白表达情况，如果我们未检测到，将全额退款。
人源全长 cDNA 克隆病毒载体选择

预制腺病毒对照

产品序号	产品名称
CV1001	腺病毒GFP对照	10E10pfu/ml
CV10010	Cre-腺病毒	10E10pfu/ml
CV10011	RFP-腺病毒	10E10pfu/ml
CV10012	Luciferase-腺病毒	10E10pfu/ml
CV10013	EF-α-GFP-腺病毒	10E10pfu/ml

2. 腺病毒包装服务

腺病毒 cDNA ORF 质粒是将人类全长 cDNA ORF 克隆至腺病毒载体 pAD Vector。
将外源 DNA 插入到 35KB 的腺病毒基因组中是非常具有挑战性的。Vigene 创新性的技术，使我们可以将每个人类 ORF 克隆都装到腺病毒载体中。
通过 3 个简单的步骤，就可将您感兴趣的基因包装成腺病毒。

购买 Vigene’s AD-ORF 克隆 —> Pacl 或 Swal 限制性内切酶线性化 —> 转染 HEK293 细胞

	pAD 腺病毒载体
载体图谱
标签	C-端 His-Flag
用途	• 安全 & 简单的腺病毒包装

主要优点
• 15,000 个腺病毒ORF cDNA 克隆随时可用
• NextGen 测序二代全长序列验证
• 最有竞争力的价格 & 次日发货

技术参数
• 绝对安全
- pAD载体(血清5型) E1/E3 区缺失，防止自我复制
• 与普通质粒一样，可在大肠杆菌中复制
• C-端 Flag-His 标签更易检测
• 具有 Kanamycin 抗性可作为筛选标记
• 独特的载体设计可容纳 10.3kb 以上的片段
需要准备好的随时可用来转染的腺病毒吗？欢迎访问预制腺病毒了解更多信息！
欢迎访问：www.vigenebio.cn，或拨打400-077-2566咨询。

3.腺相关病毒 (AAV) 包装服务

腺相关病毒是目前发现的一类结构最简单、无包膜的单链DNA缺陷型病毒，对分裂或者不分裂的细胞均具有感染能力。
重组腺相关病毒载体(rAAV) 源于非致病的野生型腺相关病毒，由于其安全性好、宿主细胞范围广(分裂和非分裂细胞)、免疫源性低，在体内表达外源基因时间长等特点，这些特点使重组AAV成为用于基因转移和基因治疗的一个非常有吸引力的工具载体。

腺相关病毒操作手册

迄今为止，许多临床试验使用腺相关病毒载体进行基因治疗，包括CFTR，Hemophilia B， Arthritis 和 Parkinson's diseas，临床I期和II期试验都获得理想的结果。

Vigene 已经开发出最为强大和专业的AAV包装服务，可以为您提供小体积病毒原液和大体积定制纯化产品。我们的产品研发平台可以满足您所有科研和基因治疗领域的需求。Vigene 强大的AAV生产系统，使AAV作为一系列疾病的治疗手段变得非常简单。

不同规格的rAAV产品（病毒滴度）：

Vigene为您提供了一整套设计、克隆、包装和生产可随时转染的重组 AAV 病毒的服务，还包括病毒制备、病毒提取、纯化和滴度测定等服务。

服务名称	产品类别	产品规格	病毒滴度
纯化AAV包装服务	纯化	500ul	10¹²V.G/ml
纯化AAV包装服务	纯化	500ul	10¹³V.G/ml
纯化AAV包装服务	纯化	500ul	10¹⁴V.G/ml
纯化AAV对照	纯化	500ul	10^12-13V.G/ml

不同血清型的AAV在各组织器官细胞的亲和性：

血清型	组织亲和性
AAV1	肌肉，心脏，骨骼肌（包括心肌），神经组织
AAV2	中枢神经，肌肉，肝脏，脑组织，眼，
AAV5	肺，眼，中枢神经，关节滑膜，胰腺
AAV6	肺，心脏
AAV7	肌肉，肝脏
AAV8	肝脏，眼，中枢神经，肌肉
AAV9	心脏，肌肉，肺（肺泡），肝脏，中枢神经

感染效率与不同细胞类型的对照表：

如何测定病毒滴度：

通过Q-PCR测定1ml样品中病毒基因组拷贝数并同标准样品相比较的来确定病毒滴度，下面通过数据展示如何测定AAV滴度。

纯化后AAV病毒的纯度：

AAV蛋白质成分是VR1 82kDa，VR2 72kDa和VR3 62kDa。因此，一个纯化好的AAV在SDA-PAGE分析应该只显示三个主要的蛋白带。下面的图像显示是我们纯化AAV病毒的蛋白质成分。

腺相关病毒（纯化）

相关服务连接：

  腺相关病毒服务
  AAV载体克隆服务
  AAV shRNA 载体构建服务

更多AAV载体信息请登录：http://www.vigenebio.cn/index.php?c=content&a=show&id=130 或您想咨询更多产品信息：请拨打400-077-2566咨询。

4.慢病毒包装服务

慢病毒介导的基因传递已与腺病毒、腺相关病毒一起成为最流行的基因传递工具。具有可用于瞬时或稳定表达的优点，可感染分裂期和间期的细胞。
Vigene 凭借拥有业内最大的18000个人类全长cDNA克隆库的优势，可在2-3周内生产出高滴度的慢病毒产品。

主要优点：

• 18000个现货cDNA

克隆可在2-3天由穿梭载体克隆至慢病毒载体,2周即可交付慢病毒
• 1270个现货人源miRNA克隆可以穿梭至慢病毒载体进行瞬时或稳定表达
• 多种慢病毒载体可供选择，C-端或N-端带有荧光标记（GFP、RFP)和亲和标签
• 多种 shRNA 的慢病毒载体及4in1shRNA载体可用于RNAi研究
• 可根据客户要求提供不同滴度（高或低）的慢病毒产品
• 严格的质量控制：基因特异引物检测、Real-time PCR病毒滴度测定
• 可将您感兴趣的任何基因克隆至我们的慢病毒载体进行慢病毒生产
• 我司慢病毒均采用超速离心纯化方式纯化，更适用于动物实验

病毒纯化与浓缩:

Q-PCR测定滴度，纯化浓缩后的慢病毒滴度达
到2.5x10E10 GC/ml，几乎比未纯化病毒多三个数
量级。
感染HEK293细胞48h后，计算被慢病毒感染阳性
GFP细胞，GFP感染的单位在4.6x10E9IU/ml,而未
纯化浓缩的慢病毒只有2.3x10E6 IU/ml。

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地址：山东省济南市历城区港源四路416号
电话：0531-88896821
售前热线：4000772566
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