1. DD是什么？

“不稳定结构域”（destabilizing domains，DD），是FK506-雷帕霉素结合蛋白FKBP突变体L106P，大小12kD。当它与其它蛋白融合后,会由泛素-蛋白酶体系统介导被快速组成型降解。而当加入细胞渗透性、能特异结合DD的小分子配体Shield1时,融合蛋白不再被降解,目的蛋白恢复行使正常的细胞功能，并且呈现可逆与剂量依赖性。因此,DD-Shield1系统能可逆控制蛋白表达，也正是因为这一点，被认定是一项有前途的技术正得到广泛关注。

 

2. DD和Shield1的关系？

简单来说，DD作为一个小型不稳定蛋白与其他蛋白融合后，融合蛋白则被降解，Shield1则能抑制其降解，恢复融合蛋白的表达及生物学功能。

3. 生物学意义：

利用蛋白稳定性的药物诱导表达系统（DD-Shield1系统）在活体内和体外使某一基因可逆表达，利用这一系统可使因蛋白失活而表型改变的细胞或活体表型得到部分或全部恢复，这为细胞和活体生物严谨调控蛋白功能提供了一种新的策略。

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4.DD-Shield1系统优势：

快速： 在细胞水平上,Shield1可在15-30 min内快速调节蛋白表达量，相反，在去除Shield1后，蛋白降解的半衰期可缩短至30分钟；比转录开关机制或RNAi技术速度更快。

精确： DD-Shield1系统可以直接靶定蛋白,,通过调节Shield1浓度,可以精确调控融合蛋白的表达量；

可逆： 它可通过配体浓度变化可逆调控蛋白表达水平,弥补了其他条件性控制蛋白表达的不足，如Cre-loxP系统和四环素系统所造成的干扰是不可逆的；

 

5.维真DD-Shield1系统相关服务：

服务内容： 维真可将不稳定结构域DD连接在您想要表达的蛋白之前，构建融合蛋白表达载体，协助您研究蛋白可逆表达给细胞或者动物所带来的生物学影响。

技术支持：

① DD诱导GFP蛋白的降解

GFP对照	DD-gfp对照

分析：将GFP单独表达的质粒与DD-GFP融合表达的质粒分别转染293细胞，发现融合不稳定蛋白DD后，GFP表达明显降低； 说明，DD诱导了GFP蛋白的降解；

 

② shield1可完全或者部分恢复GFP的表达

DD-gfp
Shield1	（-）	+（24h）	+（48h）

分析：与无配体处理的细胞相比，加入Shield1 配体（1µM）后，细胞中GFP恢复表达，且呈现一定的时间依赖性。